Foreasy Taq DNA Polymerase
Kit Beschreiwung:
◮Héich Spezifizitéit: Den Enzym huet eng gewëssen Hot-Start Aktivitéit.
◮Schnell Verstärkung: 10 Sek./Kb.
◮Héich adaptéierbar Schabloun: kann benotzt ginn fir effizient GC High Valeur ze verstäerken, verschidde schwéier ze verstäerken DNA Schablounen.
◮Staark Vertrauen: gewéinlech Taq Enzym 6 Mol.
◮Staark thermesch Stabilitéit: Et kann op 37 ° C fir eng Woch plazéiert ginn an hält méi wéi 90% Aktivitéit.
Beschreiwung
Foreasy Taq DNA Polymerase ass en neit Taq Enzym ausgedréckt an Escherichia coli Ingenieursbakterien duerch Genrekombinatiounstechnologie.D'Enzym selwer huet eng gewëssen Hot-Start Aktivitéit a kann fir konventionell PCR an qPCR benotzt ginn;et huet 5'→3' DNA Polymerase Aktivitéit an 5'→3' Exonuclease Aktivitéit, awer keng 3'→5' Exonuclease Aktivitéit.
Kit Komponente
| Komponent | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
| Foreasy Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 5000 U (1 ml) | 50 KU (10 ml) | 500 KU (100 ml) |
| 2 × Taq Reaktioun Buffer | 25 ml × 5 | 250 ml × 5 | 500 ml × 25 |
Fonctiounen & Virdeeler
- Héich Spezifizitéit: D'Enzym huet eng gewëssen Hot-Start Aktivitéit.
- Schnell Verstärkung: 10 Sekonnen/Kb.
- Héich adaptéierbar Schabloun: ka benotzt ginn fir effizient GC High Valeur ze verstäerken, verschidde schwéier ze verstäerken DNA Schablounen.
- Staark Vertrauen: gewéinlech Taq Enzym 6 Mol.
- Staark thermesch Stabilitéit: Et kann op 37 ° C fir eng Woch plazéiert ginn an hält méi wéi 90% Aktivitéit
Kit Applikatioun
Verschidde PCR / qPCR Systemer an direkt PCR Systemer
PCR Amplifikatioun vun DNA Fragmenter
DNA Etikettéierung
DNA Sequenzéierung
PCR A-tailed
U Definitioun
1U: D'Quantitéit un Enzym erfuerderlech fir 10 nmol vun Deoxynukleotiden an sauer-onlöslecher Matière anzebezéien mat aktivéierter Saumon Sperma DNA als Schabloun / Primer fir 30 Minutten bei 74 ° C.
Reaktioun Conditioun
| Temperatur | Zäit | Zyklus |
| 37°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 10 Sekonnen | 35 |
| 60°C | 10 Sekonnen | |
| 72°C | 20 sec/kb | |
| 72°C | 2 min | 1 |
Stockage
-20 ± 5 °C fir 2 Joer oder bei -80 °C fir laangfristeg Lagerung.
Keng Verstäerkungssignaler
1.D'Taq DNA Polymerase am Kit verléiert seng Aktivitéit wéinst falscher Lagerung oder Verfall vum Kit.
Empfehlung: Bestätegt d'Späicherkonditioune vum Kit;nei fügen eng entspriechend Quantitéit vun Taq DNA Polymerase un de PCR System oder kaaft en neien Real Time PCR Kit fir ähnlech Experimenter.
2.Et gi vill Inhibitoren vun Taq DNA Polymerase an der DNA Schabloun.
Virschlag: Repurify der Schabloun oder reduzéieren d'Quantitéit vun Schabloun benotzt.
3.D'Mg2+ Konzentratioun ass net gëeegent.
Empfehlung: D'Mg2+ Konzentratioun vun der 2 × Real PCR Mix déi mir ubidden ass 3.5mM.Wéi och ëmmer, fir e puer speziell Primer a Schabloune kann d'Mg2+ Konzentratioun méi héich sinn.Dofir kënnt Dir direkt MgCl2 derbäi fir d'Mg2+ Konzentratioun ze optimiséieren.Et ass recommandéiert de Mg2+ 0.5mM all Kéier fir Optimisatioun ze erhéijen.
4.D'PCR Amplifikatiounsbedéngungen sinn net gëeegent, an d'Primer Sequenz oder Konzentratioun ass falsch.
Virschlag: confirméiert d'Korrektheet vun der Primer Sequenz an de Primer ass net ofgebaut ginn;Wann d'Verstäerkungssignal net gutt ass, probéiert d'Annealtemperatur ze senken an d'Primerkonzentratioun entspriechend unzepassen.
5.De Betrag vun der Schabloun ass ze wéineg oder ze vill.
Recommandatioun: Maacht Schabloun Lineariséierungsgradientverdünnung a wielt d'Schablounkonzentratioun mat dem beschten PCR Effekt fir Echtzäit PCR Experiment.
NTC huet ze héich fluorescence Wäert
1.Reagent Kontaminatioun während Operatioun verursaacht.
Recommandatioun: Ersetzen mat neie Reagenz fir Echtzäit PCR Experimenter.
2.Kontaminatioun ass während der Virbereedung vum PCR Reaktiounssystem geschitt.
Recommandatioun: Huelt déi néideg Schutzmoossnamen während der Operatioun, wéi: Latex Handschuesch droen, Pipettespëtz mat Filter benotzen, asw.
3.D'Primer ginn ofgebaut, an d'Degradatioun vun de Primer wäert net spezifesch Amplifikatioun verursaachen.
Virschlag: Benotzt SDS-PAGE Elektrophorese fir z'entdecken ob d'Primeren ofgebaut ginn, an ersetzen se mat neie Primer fir Echtzäit PCR Experimenter.
Primer Dimer oder net spezifesch Amplifikatioun
1.D'Mg2+ Konzentratioun ass net gëeegent.
Empfehlung: D'Mg2+ Konzentratioun vun der 2 × Real PCR EasyTM Mix déi mir ubidden ass 3,5 mM.Wéi och ëmmer, fir e puer speziell Primer a Schabloune kann d'Mg2+ Konzentratioun méi héich sinn.Dofir kënnt Dir direkt MgCl2 derbäi fir d'Mg2+ Konzentratioun ze optimiséieren.Et ass recommandéiert de Mg2+ 0.5mM all Kéier fir Optimisatioun ze erhéijen.
2.D'PCR annealing Temperatur ass ze niddreg.
Virschlag: Erhéije d'PCR-Glühungstemperatur all Kéier ëm 1 ℃ oder 2 ℃.
3.De PCR Produkt ass ze laang.
Recommandatioun: D'Längt vum Echtzäit PCR Produkt soll tëscht 100-150bp sinn, net méi wéi 500bp.
4.D'Primer ginn ofgebaut, an d'Degradatioun vun de Primer féiert zu der Erscheinung vu spezifescher Amplifikatioun.
Virschlag: Benotzt SDS-PAGE Elektrophorese fir z'entdecken ob d'Primeren ofgebaut ginn, an ersetzen se mat neie Primer fir Echtzäit PCR Experimenter.
5.De PCR System ass falsch, oder de System ass ze kleng.
Virschlag: De PCR Reaktiounssystem ass ze kleng wäert d'Detektiounsgenauegkeet erofgoen.Et ass am beschten de Reaktiounssystem recommandéiert vum quantitative PCR Instrument ze benotzen fir den Echtzäit PCR Experiment nei auszeféieren.
Schlecht Wiederholbarkeet vu quantitative Wäerter
1.D'Instrument ass falsch.
Virschlag: Et kënne Feeler tëscht all PCR Lach vum Instrument sinn, wat zu enger schlechter Reproduzibilitéit wärend der Temperaturmanagement oder Detektioun resultéiert.Kuckt w.e.g. no den Instruktioune vum entspriechende Instrument.
2.D'Probe Rengheet ass net gutt.
Empfehlung: Onrein Proben féieren zu enger schlechter Reproduzibilitéit vum Experiment, wat d'Rengheet vun der Schabloun a Primer enthält.Et ass am beschten d'Schabloun nei ze purifizéieren, an d'Primer ginn am beschten duerch SDS-PAGE gereinegt.
3.D'PCR System Virbereedung a Späicherzäit ass ze laang.
Virschlag: Benotzt den Echtzäit PCR System fir PCR Experiment direkt no der Virbereedung, a loosst et net ze laang op der Säit.
4.D'PCR Amplifikatiounsbedéngungen sinn net gëeegent, an d'Primer Sequenz oder Konzentratioun ass falsch.
Virschlag: confirméiert d'Korrektheet vun der Primer Sequenz an de Primer ass net ofgebaut ginn;Wann d'Verstäerkungssignal net gutt ass, probéiert d'Annealtemperatur ze senken an d'Primerkonzentratioun entspriechend unzepassen.
5.De PCR System ass falsch, oder de System ass ze kleng.
Virschlag: De PCR Reaktiounssystem ass ze kleng wäert d'Detektiounsgenauegkeet erofgoen.Et ass am beschten de Reaktiounssystem recommandéiert vum quantitative PCR Instrument ze benotzen fir den Echtzäit PCR Experiment nei auszeféieren.
-
Animal Tissue Direct PCR Kit (ouni Sampling ...
-
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG (ouni Sample ...
-
Déieren Tissue DNA Isolatioun Kit DNA Extraktioun ...
-
Déier Total RNA Isolatioun Kit Total RNA Extraktioun ...
-
Zell Total RNA Isolatioun Kit Total RNA Isolatioun ...
-
General Plasmid Mini Kit General Plasmid DNA Ex...
