Déi folgend Analyse vu méigleche Problemer amBuccalschwammen/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

D'Reinigungskolonne ass verstoppt

An dësem Kit, an der genomescher DNA Extraktioun Operatioun, gëtt d'Reinigungskolonn direkt op der Probe enzymatesch Lysismëschung adsorbéiert ouni Zentrifugéierungsschrëtt, an d'Reinigungskolonn kann blockéiert ginn wéinst onkomplett Enzymiséierung an héijer Viskositéit vun der Probe.

Déi folgend méiglech Ursaachen sinn wéi follegt:

1. Onkomplett enzymatesch Verdauung vun Tissueproben.

Recommandatioun: D'Probeveraarbechtungszäit vu Foregene Protease kann entspriechend verlängert ginn oder de Supernatant kann no der Zentrifugatioun bei 12.000 RPM (~ 13.400) geholl ginn× g) 5 min.

2. Exzessiv Notzung vun Tissueproben oder grouss Stoffer.

Recommandatioun: Et ass am beschten net méi wéi 1Buccal Swab an der Probe;Wann d'Probe ze grouss ass, erhéicht d'Doséierung vum Buffer ST1, Foregene Protease, Puffer ST2 entspriechend.

3. D'Probe Viskositéit ass ze héich.

Empfehlung: Echantillon kënne mat 10 mM Tris-HCl adequat verdünnt ginn virum genomeschen DNA Extraktioun.

4. Fragmenter vun der Blutkaart goufen gesuckelt.

Empfehlung: D'transient Zentrifugéierungszäit vum Schrëtt 6 vu Bluttflecken (FTA Card) genomesch Extraktioun kann entspriechend verlängert ginn.

Niddereg Ausbezuele oder keng DNA

Et ginn dacks eng Vielfalt vu Faktoren, déi den genomesche DNA Ausbezuele beaflossen, dorënner Prouforigin, Probelagerungsbedéngungen, Probepräparatioun, Manipulatioun, etc.

Genomesch DNA kann net während der Extraktioun kritt ginn

Déi méiglech Ursaachen sinn wéi follegt:

1. Ongerecht Konservatioun vu Proben oder Lagerung fir ze laang féiert zu genomesch DNA Degradatioun.

Recommandatioun: Oral Swabs sollten am léifsten frësch gepréift ginn, an et ass net unzeroden konservéiert Swabs fir genomesch DNA Extraktiounsoperatiounen ze benotzen;Blutt Fleck Echantillon soll sécherstellen, datt d'Qualitéit qualifizéiert ass an der Stockage Zäit soll net ze laang sinn.

2. Ze wéineg Tissuverbrauch kann zu keng Extraktioun vun der entspriechender genomesch DNA féieren.

Recommandatioun: Follegt derbuccal Swab Sampling Uweisungen am Operatioun Guide, a wëschen esou oft wéi méiglech, sou datt genuch Zellen un der mëndlech Swab fir genomic DNA Extraktioun befestegt ginn;fir Bluttfleckenproufextraktioun kann d'Bluttfleckenschneidfläch passend erhéicht ginn.

3. Foregene Protease ass falsch konservéiert, wat zu enger Ofsenkung vun hirer Aktivitéit oder Inaktivéierung resultéiert.

Recommandatioun: Confirméieren der Stockage Konditiounen vunden Foregene Protease oder ersetzen et mat enger neier Foregene Protease fir enzymatesch Reaktioun.

4. Ongerechte Konservatioun vum Kit oder d'Späicherzäit ass ze laang, wat zu engem Ausfall vun e puer Komponenten am Kit resultéiert.

Recommandatioun: Kaaft eng neiBuccal swab DNAIsoléierung Kit fir Zesummenhang Prozeduren.

5. Buffer WB gëtt net absolut Ethanol.

Recommandatioun: Bestätegt datt de Puffer WB de richtege Volumen vun absoluten Ethanol bäidréit.

6. D'Eluent gëtt net korrekt an de Silikonfilm hinzugefügt.

Recommandatioun: Füügt 65°CPre-gewiermt Eluent fällt an d'Mëtt vun der Silikonmembran a léisst bei Raumtemperatur fir 5 min fir d'Elutiounseffizienz ze erhéijen.

Low-yield genomesch DNA isoléiert

Déi folgend méiglech Ursaachen sinn wéi follegt:

1. Ongerecht Konservatioun vu Proben oder Lagerung fir ze laang féiert zu genomesch DNA Degradatioun.

Recommandatioun: Oral Swabs ginn am léifsten frësch gepréift, a konservéiert Swabs sollten net fir genomesch DNA Extraktioun benotzt ginn.

2. Wann d'Quantitéit vum Tissueprobe ze kleng ass, gëtt den extrahéierten genomesche DNA Inhalt manner.

Recommandatioun: Follegt d'mëndlech Swab Sampling Instruktiounen am Operatiounsguide, wëschen esou oft wéi méiglech, sou datt genuch Zellen un de mëndleche Swab fir genomesch DNA Extraktioun befestegt kënne ginn.

3. Foregene Protease ass falsch konservéiert, wat zu enger Ofsenkung vun hirer Aktivitéit oder Inaktivéierung resultéiert.

Recommandatioun: Confirméieren der Stockage Konditiounen vunthe Foregene Protease oder ersetzen et mat engem neien Foregene Protease fir enzymatesch Reaktioun.

4. Eluent Problemer.

Recommandatioun: Benotzen Buffer EB fir elution;wann Dir ddH benotzt₂O oder aner Eluenter, bestätegen datt de pH vum Eluat tëscht 7,0-8,5 ass.

5. D'Eluat gëtt net richteg drop gesat.

Recommandatioun: Füügt d'Eluentdrëpsen an d'Mëtt vun der Silikonmembran a léisst bei Raumtemperatur fir 5 min fir d'Elutiounseffizienz ze erhéijen.

6. D'Elutiounsflëssegkeet accumuléiert ze wéineg.

Recommandatioun: Benotzt eluent fir genomesch DNA-Elutioun wéi néideg an den Instruktiounen, op d'mannstnet manner wéi 15μl.

Low Rengheet of genomesch DNAisoléiert

Niddereg genomesch DNA Rengheet kann zu Echec oder onzefriddenen Resultater vun Downstream Experimenter féieren, sou wéi: Enzyme kënnen net opgeschnidde ginn, PCR kann d'Genfragment vum Interesse net kréien, etc.

Déi méiglech Ursaachen sinn wéi follegt:

1. Heteroprotein Pollutioun, RNA Pollutioun.

Analyse: D'Rengungskolonne gouf net mat Buffer PW gewäsch;de Buffer PW Wäschreinigungskolonne gouf net mat der korrekter Zentrifugalgeschwindegkeet gewäsch.

Recommandatioun: Vergewëssert Iech datt et kee Nidderschlag am Supernatant ass ier Ethanol bäigefüügt gëtt;gitt sécher d'Reinigungskolonne no den Instruktiounen ze wäschen, an dëse Schrëtt kann net ausgelooss ginn.

2. Gëftstoffer Ion Verschmotzung.

Analyse: Buffer WB Wäschreinigungskolonne gouf ausgeliwwert oder nëmmen eemol gewascht, wat zu enger verbleiwen ionescher Kontaminatioun resultéiert.

Recommandatioun: Ginn sécher de Buffer WB 2 Mol ze wäschen wéi virgesinn fir d'Ionen sou vill wéi méiglech ze läschen.

3. RNA Enzym Kontaminatioun.

Analyse: Auslänner RNases goufen zu Puffer dobäi;Buffer PW wäschen Operatioun war falsch, doraus zu RNase Reschter, Afloss downstream RNA experimentell Operatiounen, wéi in vitro Transkriptiouns.

Recommandatioun: Foregene Serie Nukleinsäureisoléierttion Kits kënnen RNA ewechhuelen ouni zousätzlech Zousatz vun RNase,esou buccal Swab / FTA Card DNA Isolatioun Kitbrauch't derbäi RNase;gitt sécher op d'Instruktioune fir Buffer PW Wäschreinigungskolonne ze verfollegen, an dëse Schrëtt kann net ausgelooss ginn.

4. Ethanol Rescht.

Analyse: Buffer WB huet keng eidel Röhre Zentrifugerung gemaach nodeems d'Reinigungskolonne wäscht.

Recommandatioun: Maacht déi richteg eidel Röhre Zentrifugerungsoperatioun no den Instruktiounen.

5. Aner Gëftstoffer Verschmotzung.

Analyse: Gespäichert Proben oder speziell Proben ginn net virbehandelt.

Empfehlung: grëndlech virbehandelen d'Probe wéi uginn.