Den nidderegen Verhältnis vun A260 / A230 gëtt normalerweis duerch Gëftstoffer mat der maximaler Absorptiounswellelängt bei 230nm verursaacht.Loosst eis kucken wat dës Gëftstoffer enthalen:

• Gemeinsam Verschmotzung	Absorptiounswellelängt	Verhältnis Effekt
  Protein	~230nm an 280nm	Gläichzäiteg Reduktioun vun A260/A 280an A260/A 280Verhältnisser
  Guanidin Salz	220-240 nm	Reduzéiert den A260/A 280Verhältnis
  Phenol	~270 nm	-
  Trizol	~230nm an 270nm	Reduzéiert den A260/A 280Verhältnis
  EDTA	~230 nm	Reduzéiert den A260/A 280Verhältnis
  Ethanol	230-240 nm	Reduzéiert den A260/A 280Verhältnis

 
 
 
Absorptiounswellelängt a Kontrastwäert vu gemeinsame Pollutanten

Protein Kontaminatioun
Proteinverschmotzung kann als déi heefegst Verschmotzung am Nukleinsäure Extraktiounsprozess ugesi ginn.Protein existéiert tëscht der ieweschter wässerlecher Phase an der ënneschterorganeschPhase.D'Verschmotzung wäert d'Verhältnis vun A260/A280 an A260/A230 zur selwechter Zäit reduzéieren, an de Verhältnis vun A260/A230 wäert méi kloer änneren wéi d'Verhältnis vun A260/A280.
Während der spéiderëmgedréint Transkriptiounor qPCR Reaktiounen, Proteinreschter kënnen d'Enzymfunktioun hemmen oder stéieren.De beschte Wee fir Proteinkontaminatioun ze vermeiden ass de Prinzip vun "méi manner wéi méi, eng kleng Quantitéit vill Mol" am Kapp ze halen wann Dir de Supernatant aspiréiert.

2. Guanidinium Verschmotzung
Hydrochlorid (GuHCl) a Guanidin-Thiocyanat (GTC) hunn den Effekt vun denaturéierende Proteinen, déi Zellmembranen während dem Nukleinsäure-Extraktiounsprozess séier zerstéieren kënnen, wat Proteindenaturatioun a Nidderschlag verursaacht.D'Absorptiounswellelängt vu GuHCl a GTC ass tëscht 220-240 nm, anRescht Guanidinium Salz wäert d'Verhältnis vun A260 / A230 reduzéieren.Och wann de Rescht Guanidinium Salz de Verhältnis reduzéiert,den Impakt op downstream Experimenter ass eigentlech negligible.

3. Trizol Kontaminatioun
Den Haaptkomponent vum Trizol ass Phenol.D'Haaptfunktioun vum Phenol ass Zellen ze lyséieren an Proteinen an Nukleinsäure Substanzen an Zellen ze befreien.Och wann Phenol effektiv Proteine ​​​​denaturéiere kann, kann et d'RNase Aktivitéit net komplett hemmen.Dofir ginn 8-Hydroxyquinolin, Guanidin-Isothiocyanat, β-Mercaptoethanol, asw.
Wann Dir cellulär RNA extrahéiert, kann Trizol d'Zellen séier lyséieren an d'Nuklease, déi aus den Zellen fräigelooss gëtt, hemmen, an de Rescht Trizol wäert de Verhältnis vun A260/A230 wesentlech reduzéieren.
Veraarbechtungsmethod: Beim Zentrifuge muss et bemierkt ginn datt de Phenol am Trizol liicht löslech an der Waasserphase ënner der Bedingung vu 4 ° a Raumtemperatur ass.

4. Ethanol Rescht
Ethanol gëtt am leschte Prozess benotzt fir d'DNA auszeschléissen wärend Salzionen opléisen déi un d'DNA gebonnen kënne sinn.D'Absorptiounswellelängt vun der héchsterAbsorptioun Héichpunkt vunEthanol ass och bei 230-240 nm, watwäert och d'Verhältnis vun A260 / A230 reduzéieren.
D'Methode fir Ethanolreschter ze vermeiden kann zweemol wärend der leschter Elutioun widderholl ginn, bléist an derDampschëfffir zwou Minutten fir den Ethanol komplett ze verdampen ier Dir Puffer fir d'Elutioun bäidréit.
Wéi och ëmmer, et sollt bekannt sinn datt de Verhältnis nëmmen en Evaluatiounsindex vun der RNA Qualitéit ass.Wann déi uewe genannten Operatiounen strikt reglementéiert sinn, wäert d'Ofwäichung tëscht dem Verhältnis an dem Standardberäich kee groussen Impakt op Downstream Experimenter hunn.
Zesummenhang Produkter:
Déier Total RNA Isolatioun Kit
Plant Total RNA Isolatioun Kit
Zell Total RNA Isolatioun Kit
Plant Total RNA Isolation Kit Plus