Aféierung:

RNA, wëssenschaftleche Numm Ribonukleinsäure, seng Ofkierzung kënnt vu RiboNukleinsäure, ass eng Zort Nukleinsäure geformt andeems op d'mannst Dosende vu Ribonukleotiden duerch Phosphodiesterbindungen verbënnt.

D'Viraussetzung fir d'RNA z'erklären ass d'Verschmotzungsfräi Total RNA ze extrahieren, an de Basisprinzip vun der RNA-Extraktioun kann ongeféier wéi follegt zesummegefaasst ginn:

1. Stéieren d'Zellen als éischt

2. Dann ewechhuelen makromolekulär Gëftstoffer (Proteinen, Lipiden, DNA, etc.)

3. Schlussendlech gëtt d'RNA ausgefällt wärend d'Salze an d'organesch Léisungsmëttel ewechgeholl ginn, an d'RNA weider purifizéieren

Vergaangenheet an haut vun Extraktioun Method

Déi éischt Generatioun vun RNA Extraktioun Method ass d'TRIzol Nidderschlag Method (reagente benotzt och guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, etc.) Erfonnt vun engem Grousspapp genannt Piotr Chomczynski a Groussmamm Nicoletta Sacchi, well dës Erfindung erlaabt RNA Extraktioun Quick an einfach, zënter ugefaang der RNA Fuerschung.

Méi spéit huet de Bopa dëse Patent un Invitrogen verkaaft, an Invitrogen huet dës Method op d'Welt gefördert a gouf eng wäit benotzt Method.

Spéider gouf Invitrogen vun Thermo!

Representativ Produkt: Invitrogens TRIzol Reagens

Wéi och ëmmer, d'TRIzol Nidderschlagsmethod erfuerdert multiple Nidderschlag an Extraktioun vun RNA, an d'Reagenz benotzt gi gëfteg an huelen eng laang Zäit fir ze bedreiwen.

Dofir ass déi zweet Generatioun Kolonn-Enzym Reinigungsmethod entstanen, Silicagel Membran benotzt als spezifescht Nukleinsäure Adsorptiounsmaterial fir d'Erhuelung vun RNA an der Probe ze maximéieren wärend aner Gëftstoffer ewechhuelen.

Déi zweet Generatioun Method vereinfacht d'Operatioun op der Basis vun der stabiler Leeschtung, reduzéiert de Risikofaktor a verbessert d'Effizienz vun der RNA Extraktioun.

Representativ Produkter: QIAGEN RNeasy an déi meescht Hausprodukter

Wéi och ëmmer, souwuel déi éischt wéi och déi zweet Generatioun Methoden erfuerderen d'Benotzung vun DNase fir DNA Kontaminatioun ze läschen, wat e puer Nodeeler fir spéider Downstream Experimenter bréngt.Residual DNase wäert d'Effizienz vun der ëmgedréint Transkriptioun reduzéieren an d'éischt-Sträng cDNA Synthese reduzéieren, doduerch d'Genauegkeet vun de Resultater beaflossen.

Dofir gëtt déi drëtt Generatioun Extraktiounsmethod op Basis vun der zweeter Generatioun optimiséiert.D'Experiment brauch keng Enzymen ze addéieren, an RNA kann einfach mat nëmmen zwou Kolonnen kritt ginn.

Kolonn 1: DNA-Cleaning Kolonn fir DNA ze läschen

Kolonn 2: RNA-nëmmen Kolonn adsorbéiert a recuperéiert RNA spezifesch

Sou eng einfach Operatioun spuert net nëmmen Zäit, awer erliichtert och d'Operatioun vun Downstream Experimenter!

Vertrieder Produiten: QIAGEN RNeasy Plus anVirdrunRNA Purification Serie Produkter

(RNeasy Plus)

（VirdrunPlant Total RNA Isolation Kit)

Sot dir roueg!Foregene's RNA Kit presentéiert och e super einfach ze benotzen RNase Eraser, deen 400μg RNase op der fester Uewerfläch an 1 Minutt komplett ewechhuelen kann, ouni gëfteg Substanzen zum mënschleche Kierper ze addéieren!

Foto1: Operationell Prozess Verglach Chart

Foregene d'Produkter kënnen d'RNA Extraktioun an nëmmen zwee Lidder komplett maachen, maachen net anerer jalous vun Ärem Experiment Fortschrëtter!

Foto2:Eexperimentell Resultater Verglach Chart

Déi éischt Generatioun (1: TRIzol)

Déi zweet Generatioun (2: RNeasy vu QIAGEN)

Déi drëtt Generatioun (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Foto3: qPCR Grafik (Verstäerkungskurve Grafik)

Déi éischt Generatioun (gréng heescht TRIzol -, rout heescht TRIzol +)

Déi zweet Generatioun (himmelblo heescht QIAGEN RNeasy-, rout heescht QIAGEN RNeasy +)

Déi drëtt Generatioun (blo heescht QIAGEN RNeasy plus, gréng heescht Foregene)

(Notiz: qPCR Grafik "-" weist datt d'DNase net bäigefüügt gouf an d'DNA Kontaminatioun net geläscht gouf. Dofir ass den CT méi héich an d'Resultat ass net korrekt; "+" weist datt DNase bäigefüügt gouf an d'DNA Kontaminatioun geläscht gouf, d'Resultat ass korrekt)

All technesch Upgrade bedeit datt d'Operatioun vum Experiment an enger méi einfacher a méi userfrëndlecher Richtung entwéckelt.

Foregene zielt méi wëssenschaftlech Fuerscher ze hëllefen experimentell Zäit a Käschten ze spueren, qualitativ héichwäerteg experimentell Resultater ze kréien, a gemeinsam méi wäertvoll wëssenschaftlech Fuerschung Leeschtungen ze kreéieren.