Wat ass eng mRNA Impfung
D'mRNA Impfung transferéiert RNA an d'Zellen vum Kierper fir Proteinantigenen auszedrécken an ze produzéieren no relevante Modifikatioune in vitro, doduerch datt de Kierper eng Immunantwort géint den Antigen produzéiert, an doduerch d'Immunkapazitéit vum Kierper erweidert.[1,3].
Figur 1: Schematesch Diagramm vum Effekt vun der direkter Injektioun vun der mRNA Impfung [2]
Klassifikatioun vun mRNA Impfungen
mRNA Impfungen ginn an zwou Zorte opgedeelt:net replizéiertmRNA anselbstverstäerktmRNA: Selbstverstäerkend mRNA codéiert net nëmmen den Zilantigen, mee codéiert och d'Replikatioun déi intrazellulär RNA Verstäerkung a Proteinausdrockmechanismus erméiglecht.Net-replikéierend mRNA Impfungen codéieren nëmmen Zilantigenen a enthalen 5'an 3'untransléiert Regiounen (UTR).Si bidden eng ëmfaassend Stimulatioun vun der Adaptabilitéit an der gebierter Immunitéit, nämlech in situ Antigen Ausdrock a Gefor Signal Iwwerdroung, an hunn déi folgend Uwendungen Features[2,3]
● Kann eng ëmfaassend Stimulatioun vun der Adaptabilitéit an der gebierter Immunitéit ubidden, nämlech in situ Antigen Ausdrock a Gefor Signal Iwwerdroung
●Kann eng "equilibréiert" Immunantwort induzéieren, och humoral a cellulär Effektoren an Immungediechtnes
●Kann verschidden Antigene kombinéieren ouni d'Komplexitéit vun der Impfungformuléierung ze erhéijen
Kontinuéierlech Verbesserung vum Immunpotenzial kann duerch widderholl Impfung erreecht ginn, an et gëtt keng oder wéineg Immunreaktioun op den Träger
●Hëtzt stabil mRNA Impfungen kënnen den Transport an d'Lagerung vun Impfungen vereinfachen
Figur 2: Schematesch Diagramm vun der mRNA Impfung a seng Antigen Ausdrock Mechanismus [4]
Features vu mRNA Impfungen
Am Verglach mat traditionelle Impfungen hunn mRNA Impfungen einfache Produktiounsprozesser, séier Entwécklungsgeschwindegkeet, kee Bedierfnes fir Zellkultur, a kleng Käschten.Am Verglach mat DNA Impfungen brauche mRNA Impfungen net an de Kär anzegoen an et gëtt kee Risiko vun der Integratioun am Hostgenom.D'Hallefzäit kann duerch Ännerung ugepasst ginn.
Dësch 1: Virdeeler an Nodeeler vun mRNA Impfungen
|
| Virdeel | Mängel |
| mRNA Impfung | Rapid Fuerschung an Entwécklung, Impfungproduktioun dauert nëmmen 40 Deeg | Ausléiser eng onnéideg Immunantwort
|
| mRNA Onstabilitéit ënner physiologesche Bedéngungen, einfach ze degradéieren | Wäert net an de Genom integréieren fir méiglech therapeutesch Mutatiounen ze vermeiden
| |
| Kee Besoin fir all nuklear Lokaliséierungssignal, Transkriptioun | D'Effizienz vun der Sécherheetsnuklear bleift ze verifizéieren
|
Figur 3: Flow Chart vun der mRNA Impfung Produktioun a Virbereedung [4]
Foregene Viral RNA Isolatioun Kit
RT-qPCR Easy (One Step)
Verbesserte Strategien fir d'Virbereedung vu mRNA Impfungen
Wéinst der schlechter Stabilitéit vu mRNA selwer, einfach Degradatioun duerch Nukleasen a Stoffer, geréng Zellentrée-Effizienz, a geréng Iwwersetzungseffizienz, limitéieren dës Mängel d'Applikatioun vu mRNA Impfungen.Iwwersetzungseffizienz spillt och eng ganz kritesch Roll.Liwwerung Gefierer kënnen a viral Vektoren an net-viral Vektoren opgedeelt ginn (och Liposomen, Net-Liposome, Viren, Nanopartikelen, etc.).Dofir sinn relevant Verbesserungsmoossnamen néideg.Déi folgend ass eng pharmakologesch Verbesserungsstrategie fir mRNA Virbereedung[2]
1 Synthetiséiert Cap-analogen oder benotzt Capping-Enzyme fir mRNA ze stabiliséieren an d'Protein-Iwwersetzung ze erhéijen andeems se un den eukaryoteschen Iwwersetzungsinitiativfaktor 4E (EIF4E) binden
2 Ajustéiert d'Elementer an der 5'-net iwwersat Regioun (UTR) an 3'-UTR fir mRNA ze stabiliséieren an d'Protein Iwwersetzung ze erhéijen
3 Poly(A) Schwanz bäizefügen kann mRNA stabiliséieren an d'Protein Iwwersetzung erhéijen
4 Modifizéiert Nukleosiden fir d'gebuerene Immunaktivéierung ze reduzéieren an d'Iwwersetzung ze erhéijen
5 Behandlung mat RNase III a séier Protein Liquid Chromatography (FPLC) Reinigung kann d'Immunaktivéierung reduzéieren an d'Iwwersetzung erhéijen
6 Optimiséiert Sequenzen oder Codons fir Iwwersetzung ze erhéijen
7 Co-Liwwerung vun Iwwersetzungsinitiatiounsfaktoren an aner Methoden fir Iwwersetzung an Immunogenizitéit z'änneren
Figur 4: In vitro Transkriptioun (IVT) mRNA Produktioun a Versammlungsprozess [5]
Grouss Virbereedung vu Plasmid DNA
D'Plasmid DNA Reinigung läscht haaptsächlech Kontaminanten wéi RNA, Open-Circle DNA Endotoxin, Hostprotein an Hostnukleinsäure, a transforméiert normalerweis rekombinant Plasmid an E. coli.E. coli mécht eng héich Dicht Fermentatioun, dann fest-flësseg Trennung, a Sammlung vun E. coli.Den E. coli gëtt dann un alkalescher Lysis, Zentrifugaler Feststoff-Flësseg-Trennung a Mikrofiltratiouns-Klärung no Lysis, Ultrafiltratioun a Konzentratioun no der Klärung, an dann chromatografesch Reinigung ënnerworf.
Purifikatioun vu Plasmid DNA:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J] an.免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, et al.mRNA Impfungen - eng nei Ära an der Impfung [J].Nature Reviews Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Aféierung zu RNA Impfungen.In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Methoden an der molekulare Biologie, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA als Transformativ Technologie fir Impfung Entwécklung fir Infektiiv Krankheeten ze kontrolléieren [J].Molekulare Therapie, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, MRNA Impfstoff oppassen fir d'Balance vun der Innate / Adaptive Immunreaktioun, Trends an der Molekulärer Medizin, Volume 26, Ausgab 3,2020, Säiten 311-323.
Post Zäit: Aug-05-2021
