• facebook
  • linkedin
  • youtube

Antikörper, och Immunoglobulinen (Ig) genannt, si Glykoproteine ​​déi speziell un Antigene binden.
 
Konventionell Antikörperpräparatioun gëtt produzéiert andeems Déieren immuniséieren an Antiserum sammelen.Dofir enthält Antiserum normalerweis Antikörper géint aner onrelatéiert Antigen an aner Proteinkomponenten am Serum.Allgemeng Antigenmoleküle enthalen meeschtens verschidde verschidde Epitopen, sou datt konventionell Antikörper och eng Mëschung vun Antikörper géint verschidde verschidden Epitope sinn.Och déi konventionell Serum Antikörper, déi géint deeselwechten Epitop geriicht sinn, besteet nach ëmmer aus heterogenen Antikörper produzéiert vu verschiddene B Zell Klonen.Dofir ginn konventionell Serum Antikörper och polyclonal Antikörper genannt, oder polyclonal Antikörper fir kuerz.
 
Monoklonal Antikörper (monoklonal Antikörper) ass en héich eenheetlechen Antikörper produzéiert vun engem eenzege B Zell Klon an nëmmen géint eng spezifesch Epitop geriicht.Et gëtt normalerweis duerch Hybridoma Technologie virbereet - Hybridoma Antikörper Technologie baséiert op Zellfusiounstechnologie, kombinéiert B Zellen mat der Fäegkeet fir spezifesch Antikörper a Myelomzellen mat onendlecher Wuesstumskapazitéit a B-Zell Hybridomen ze secrete.Dës Hybridomazell huet d'Charakteristike vun enger Elterenzell.Et kann onbestëmmt an onstierwlech proliferéieren in vitro wéi Myelomzellen, an et kann spezifesch Antikörper synthetiséieren a secrete wéi Milz-Lymphozyten.Duerch Klonen kann eng monoklonal Linn ofgeleet vun enger eenzeger Hybridomazell, dat heescht eng Hybridoma Zelllinn, kritt ginn.D'Antikörper déi et produzéiert sinn héich homogen Antikörper géint deeselwechten antigene Determinant, dat heescht monoklonal Antikörper.
 
Antikörper existéieren als een oder méi Y-förmleche Monomeren (dh monoklonal Antikörper oder polyklonal Antikörper).All Y-förmleche Monomer besteet aus 4 Polypeptid Ketten, dorënner zwou identesch schwéier Ketten an zwou identesch Liichtketten.Liicht Kette a schwéier Kette ginn no hirem Molekulargewiicht benannt.D'Spëtzt vun der Y-förmlecher Struktur ass déi verännerlech Regioun, déi den Antigenbindende Site ass.(Auszuch aus Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Antikörper Struktur
1Schwéier Kette
Et gi fënnef Aarte vu Mamendéieren Ig schwéier Ketten, genannt mat de griichesche Buschtawen α, δ, ε, γ, an μ.Déi entspriechend Antikörper ginn IgA, IgD, IgE, IgG an IgM genannt.Verschidde schwéier Ketten ënnerscheeden sech a Gréisst a Kompositioun.α an γ enthalen ongeféier 450 Aminosäuren, während μ an ε ongeféier 550 Aminosäuren enthalen.
All schwéier Kette huet zwou Regiounen: déi konstant Regioun an déi variabel Regioun.All Antikörper vun der selwechter Aart hunn déiselwecht konstant Regioun, awer et ginn Ënnerscheeder tëscht Antikörper vu verschiddenen Typen.Déi konstant Regioune vun de schwéiere Ketten γ, α a δ besteet aus dräi Ig-Domänen an Tandem, mat enger Scharnéierregioun fir seng Flexibilitéit ze erhéijen;déi konstant Regioune vun de schwéiere Ketten μ an ε besteet aus 4 Ig-Domänen.Déi verännerlech Regioun vun der schwéierer Kette vum Antikörper produzéiert vu verschiddene B Zellen ass anescht, awer déi verännerlech Regioun vum Antikörper produzéiert vun der selwechter B Zell oder Zellklon ass d'selwecht, an déi verännerlech Regioun vun all schwéierer Kette ass ongeféier 110 Aminosaieren an der Längt., A bilden eng eenzeg Ig Domain.
 
Liicht Kette
Et ginn nëmmen zwou Aarte vu Liichtketten bei Mamendéieren: Lambda-Typ a Kappa-Typ.All Liichtkette huet zwee verlinkte Beräicher: eng konstant Regioun an eng variabel Regioun.D'Längt vun der Liichtkette ass ongeféier 211 ~ 217 Aminosäuren.Déi zwou Liichtketten, déi an all Antikörper enthale sinn, sinn ëmmer d'selwecht.Fir Mamendéieren huet d'Liichtkette an all Antikörper nëmmen eng Zort: Kappa oder Lambda.An e puer méi niddereg Wirbeldéieren, wéi Knorpelfësch (Knorpelfësch) a Knochenfësch, ginn aner Aarte vu Liichtketten wéi den iota (iota) Typ och fonnt.
 
Fab an Fc Segmenter
De Fc-Segment kann direkt mat Enzymen oder fluoreszent Faarwen kombinéiert ginn fir Antikörper ze markéieren.Et ass deen Deel wou den Antikörper op der Plack während dem ELISA Prozess nieft, an et ass och deen Deel wou den zweeten Antikörper unerkannt a gebonnen ass an der Immunoprecipitatioun, Immunoblotting an Immunhistochemie.Antikörper kënnen an zwee F(ab) Segmenter an ee Fc-Segment hydrolyséiert ginn duerch proteolytesch Enzyme wéi Papain, oder se kënnen aus der Scharnéierregioun duerch Pepsin gebrach ginn an an ee F(ab)2-Segment an ee Fc-Segment hydrolyséiert ginn.IgG Antikörperfragmenter sinn heiansdo ganz nëtzlech.Wéinst dem Mangel vum Fc-Segment gëtt de F(ab)-Segment net mam Antigen ausfällt, an och net vun Immunzellen an in vivo Studien ageholl.Wéinst de klenge molekulare Fragmenter a Mangel u Cross-linking Funktioun (wéinst dem Manktem vum Fc Segment) gëtt de Fab Segment normalerweis fir radiolabeling a funktionnelle Studien benotzt, an de Fc Segment gëtt haaptsächlech als Blockéierungsmëttel an histochemesche Faarwen benotzt.
 
Variabel a konstant Regiounen
Déi verännerlech Regioun (V Regioun) ass op 1/5 oder 1/4 (mat ongeféier 118 Aminosaierreschter) vun der H Kette no bei der N-Terminus an 1/2 (mat ongeféier 108-111 Aminosaierreschter) no bei der N-terminus vun der L Kette.All V Regioun huet e Peptidring geformt duerch Intra-Kette Disulfidbindungen, an all Peptidring enthält ongeféier 67 bis 75 Aminosaierreschter.D'Zesummesetzung an d'Arrangement vun Aminosäuren an der V-Regioun bestëmmen d'Antigenbindungsspezifizitéit vum Antikörper.Duerch déi ëmmer verännerend Aarten a Sequenz vun Aminosäuren an der V-Regioun kënne vill Aarte vun Antikörper mat ënnerschiddleche bindenden Antigenspezifizitéiten geformt ginn.D'V Regioune vun der L Kette an H Kette ginn VL respektiv VH genannt.A VL a VH hunn d'Aminosaier Zesummesetzung an d'Sequenz vun e puer lokal Regiounen e méi héije Grad vu Variatioun.Dës Regioune ginn hypervariabel Regiounen (HVR) genannt.D'Aminosäure Zesummesetzung an d'Arrangement vun den Net-HVR Deeler an der V Regioun si relativ konservativ, wat d'Frameregioun genannt gëtt.Et ginn dräi hypervariabel Regiounen am VL, normalerweis an Aminosaierreschter 24 bis 34 respektiv 89 bis 97.Déi dräi HVRs vu VL a VH ginn HVR1, HVR2 an HVR3 respektiv genannt.D'Fuerschung an d'Analyse vun der Röntgenkristalldiffraktioun huet bewisen datt d'hypervariabel Regioun wierklech d'Plaz ass wou den Antikörperantigen bindet, sou datt et d'Komplementaritéitsbestëmmungsregioun (CDR) genannt gëtt.Den HVR1, HVR2 an HVR3 vu VL a VH kënnen CDR1, CDR2 an CDR3 respektiv genannt ginn.Allgemeng huet CDR3 e méi héije Grad vun Hypervariabilitéit.Déi hypervariabel Regioun ass och d'Haaptplaz wou déi idiotypesch Determinante vun Ig Moleküle existéieren.An de meeschte Fäll spillt d'H Kette eng méi wichteg Roll beim Bindung zum Antigen.
2Déi konstant Regioun (C Regioun)ass op 3/4 oder 4/5 (ongeféier vun Aminosaier 119 bis C-Terminal) vun der H-Kette no bei der C-Enn an 1/2 (enthält ongeféier 105 Aminosaierreschter) no bei der C-Terminus vun der L Kette.All funktionell Regioun vun der H Kette enthält ongeféier 110 Aminosaierreschter, an enthält e Peptidring, deen aus 50-60 Aminosaierreschter verbonnen ass mat Disulfidbindungen.D'Aminosaier Zesummesetzung an Arrangement vun dëser Regioun sinn relativ konstant an der selwechter Déier Ig Isotyp L Kette an der selwechter Typ H Kette.Datselwecht, et kann nëmme spezifesch un de entspriechende Antigen binden, awer d'Struktur vu senger C Regioun ass d'selwecht, dat heescht, et huet déiselwecht Antigenizitéit.D'Päerd Anti-Mënsch IgG Secondaire Antikörper (oder Anti-Antikörper) kann mat deenen zwee kombinéiert ginn Eng Kombinatioun vun Antikörper (IgG) géint verschidden Exotoxine geschitt.Dëst ass eng wichteg Basis fir sekundär Antikörper ze preparéieren an Fluorescein, Isotopen, Enzymen an aner markéiert Antikörper anzesetzen.
 
 
Zesummenhang Produkter:
Zell Direct RT-qPCR Kit

 

 


Post Zäit: Sep-30-2021