FAQ firDéier Total RNA Isolatioun Kit

Déi folgend Analyse vun de Probleemer déi Dir kënnt stousseDéier Tissue / Zell RNA Extraktioun will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

RNA gëtt net extrahéiert oder d'RNA Ausbezuele si niddereg

Et ginn dacks eng Vielfalt vu Faktoren déi d'Erhuelungseffizienz beaflossen, sou wéi: Tissueprobe RNA Inhalt, Operatiounsmethod, Elutiounsvolumen, asw.

1. Eisbad oder kryogen (4 ° C) Zentrifugéierung gouf während der Operatioun gemaach.

Recommandatioun: Bedreiwen bei Raumtemperatur (15-25 ° C) duerch de ganze Prozess, net Äisbad an centrifuge bei niddregen Temperaturen.

2. Ongerecht Probekonservatioun oder exzessiv Prouflagerzäit.

Empfehlung: Echantillon bei -80 ° C stockéieren oder a flëssege Stickstoff afréieren a widderholl Frost-Thaw benotzen;probéiert frësch Tissue oder kultivéiert Zellen fir RNA Extraktioun ze benotzen.

3. Net genuch Prouf Lysis.

Empfehlung: Wann Dir Tissue homogeniséiert, gitt sécher datt den Tissu genuch homogeniséiert ass an datt d'Tissuezellen genuch gespléckt sinn fir d'Verëffentlechung vu RNA z'erklären.

4. D'Eluent gëtt net korrekt dobäigesat.

Recommandatioun: Bestätegt datt RNase-Free ddH₂O gëtt dropweis an d'Mëtt vun der Reinigungskolonnemembran bäigefüügt.

5. De richtege Volumen vum absolute Ethanol gouf net op Buffer RL2 oder Buffer RW2 bäigefüügt.

Recommandatioun: Follegt d'Instruktioune, fügen d'korrekt Volumen vun absoluten Ethanol un de Buffer RL2 a Buffer RW2 a mëschen gutt ier Dir de Kit benotzt.

6. Tissue Prouf Doséierung ass net passend.

Empfehlung: Benotzt 10-20 mg Tissu oder (1-5) × 10⁶Zellen pro 500 μl Puffer RL1, well exzessiv Tissueverbrauch kann zu enger reduzéierter RNA Extraktioun resultéieren.

7. Ongerechte Elutiounsvolumen oder onvollstänneg Eluéierung.

Empfehlung: D'Elutiounsvolumen vun der Reinigungskolonne ass 50-200 μl;Wann d'Elutiounseffekt net zefriddestellend ass, ass et recommandéiert d'Raumtemperatur Plazéierungszäit ze verlängeren nodeems de virgehëtzten RNase-Free ddH bäigefüügt ass.₂O, zB fir 5-10 min.

8.The Purification Kolonn huet Ethanol Reschter no Buffer RW2 wäschen.

Recommandatioun: Wann et Ethanol Reschter no Buffer RW2 wäschen ass, eidel Rouer centrifugation fir 1min, d'Zäit fir déi eidel Rouer centrifugation Operatioun kann zu 2min erhéicht ginn, oder d'Rengung Kolonn kann bei Raumtemperatur fir 5 min plazéiert ginn adäquat ewechzehuelen de Rescht Ethanol.

Purifizéiert RNA gëtt ofgebaut

D'Qualitéit vun der gereinegt RNA ass verbonne mat Faktoren wéi d'Erhaalung vun der Probe, RNase Kontaminatioun, a Manipulatioun, asw.

1. Tissue Echantillon ginn net an der Zäit gehal.

Empfehlung: Wann Tissueproben oder Zellen net fristgerecht no der Sammlung benotzt ginn, cryopreserve direkt bei -80 °C oder flëssege Stickstoff.Fir RNA ze extrahieren, benotzt eng nei geholl Tissu- oder Zellprobe wann ëmmer méiglech.

2. Widderhuelend Afréiere-Tauung vun Tissueproben.

Recommandatioun: Wann Dir Tissueproben späichert, ass et am beschten se a kleng Stécker ze schneiden fir ze konservéieren, an ee vun de Stécker ze läschen wann Dir se benotzt fir widderholl Gefrier-Daching vun der Probe an d'Degradatioun vun der RNA ze vermeiden.

3. RNase gëtt agefouert oder net ewechzegeheien Handschuesch, Masken, etc.. während der Operatioun.

Empfehlung: RNA Extraktiounsexperimenter ginn am beschten an getrennten RNA Manipulatiounsraim gemaach an den Dësch gëtt virum Experiment geläscht.

Drot disposéierbar Handschuesch a Masken wärend dem Experiment fir d'RNA-Degradatioun ze minimiséieren déi duerch d'Aféierung vun RNase verursaacht gëtt.

4. Reagens gi kontaminéiert mat RNase während der Benotzung.

Recommandatioun: Ersetzen mat engem neien Animal Total RNA Isolation Kit fir ähnlech Experimenter.

5. D'Zentrifugerröhren, Tipps, etc., déi an der RNA-Manipulatioun benotzt ginn, sinn kontaminéiert mat RNase.

Empfehlung: Bestätegt datt d'Zentrifugerröhren, Tipps, Pipetten, asw.

Purifizéiert kritt RNA beaflosst downstream Experimenter

RNA gereinegt vun der Reinigungskolonne, wann d'Salzionen, de Proteingehalt ze grouss ass, beaflosst den Downstream Experiment, sou wéi: ëmgedréint Transkriptioun, Northern Blot et al.

1. Déi eluéiert RNA huet Salzionreschter.

Recommandatioun: Bestätegt datt de richtege Volumen vun Ethanol op de Buffer RW2 bäigefüügt gouf a 2 Reinigungskolonnewäschen op der Zentrifugalgeschwindegkeet fir Operatioun uginn;wann et e Salz Ionreschter ass, loosst d'Reinigungskolonne op de Buffer RW2 fir 5 min bei Raumtemperatur an fuert Zentrifugatioun fir d'Ewechhuele vu Salzkontaminatioun ze maximéieren.

2. Ethanol Rescht an elutioned RNA.

Empfehlung: Bestätegt datt nom Puffer RW2 wäschen, déi eidel Rouer-Zentrifugéierungsoperatioun mat der Zentrifugéierungsgeschwindegkeet, déi fir Operatioun uginn ass, ausféieren, d'Zäit vun der eidel Rouer-Zentrifugerungsoperatioun op 2 min erhéijen, wann et nach ëmmer Ethanolrest ass, oder lass et bei Raumtemperatur fir 5 min no der eidel Rouer-Zentrifugerung fir d'Ewechhuele vun Ethanolreschter ze maximéieren.

Isolatioun vun Nulceinsäure Probe Typen

Foregene's RNA Isolatiounskits kënnen total RNA Isolatioun / Extraktioun aus de folgende Proufsousen kréien: Déieregewebe, Planz, Zellen, viral, Blutt, asw.

Wéi späicheren ech de Kit

Raumtemperatur Lagerung fir 24 Méint.