Déier Total RNA Isolatioun Kit Total RNA Extraktioun a Purifikatioun Kits fir Déieregewebe & Zell
Kit Beschreiwung:
Schnell an effizient extrahéiert héich Rengheet an héichqualitativ total RNA aus verschiddenen Déieregewebe.
Keng Suergen iwwer RNA Degradatioun.De ganze System ass RNase-Free
Entfernt effektiv DNA mat DNA-Cleaning Column
Fuert DNA ouni DNase derbäi
Einfach - all Operatioune ginn bei Raumtemperatur ofgeschloss
Fast-Operatioun kann an 30 Minutten ofgeschloss ginn
Sécher - keen organesche Reagens benotzt
Héich Rengheet-OD260/280≈1.8-2.1
Kit Beschreiwungen
50 Virbereedungen, 200 Virbereedungen
Dëse Kit benotzt despin Kolonn an Formelvun eiser Firma entwéckelt, déi héich Rengheet a qualitativ héichwäerteg total RNA aus verschiddenen Déieregewebe mat héijer Effizienz extrahéieren kann.RNA-nëmmen Kolonn kann RNA effizient binden a ka gläichzäiteg mat enger eenzegaarteger Formel veraarbecht ginn Vill Proben.
De ganze System ass RNase-Free, sou datt déi extrahéiert RNA net ofgebaut gëtt;Buffer RW1, Buffer RW2 Puffer wäschen System, sou datt déi kritt RNA fräi vun Protein, DNA, Ion, an organesch Verbindung Pollutioun ass.
Kit Komponente
| Déier Total RNA Isolatioun Kit | ||
| Kit Komponente | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Buffer RL1* | 25ml | 100 ml |
| Buffer RL2 | 15ml | 60ml |
| Buffer RW1* | 25ml | 100 ml |
| Buffer RW2 | 24ml | 9 6ml |
| RNase-Free ddH2O | 10ml | 40ml |
| RNA-nëmmen Kolonn | 50 | 200 |
| DNA-Botzen Kolonn | 50 | 200 |
| Bedienungsanleitung | 1 Stéck | 1 Stéck |
Produit Informatiounen
| Format | Spin Kolonn | Reinigungskomponent | Foregene Kolonn, reagens |
| Flux | 1-24 Echantillon | Zäit pro Virbereedung | ~30 min (24 Echantillon) |
| Zentrifuge | Desk Zentrifuge | Pyrolyse Trennung | Zentrifugal Trennung |
| Prouf | Tissue vun Déieren;Zell | Probe Betrag | Tissue: 10-20 mg;Zell: (1-5) × 106 |
| Elutioun Volumen | 50-200 μL | Maximum Luede Volume | 850 l |
Fonctiounen & Virdeeler
■ Keng Suergen iwwer RNA Degradatioun;de ganze System ass RNase-Free
■ Effektiv ewechhuelen DNA-benotzen DNA-Cleaning Column
■ DNA ewechhuelen ouni DNase ze addéieren
■ Einfach-all Operatiounen sinn bei Raumtemperatur ofgeschloss
■ Fast -Operatioun kann an 30 Minutten ofgeschloss ginn
■ Sécher - keen organesche Reagens erfuerderlech
■ Héich Rengheet -OD260/280≈1.8-2.1
Kit Applikatioun
Et ass gëeegent fir d'Extraktioun a Reinigung vun total RNA aus enger Vielfalt vu frëschen oder gefruerenen Déieregewebe oder kultivéierten Zellen.
Produit Parameteren
■ Downstream Uwendungen: Éischt-Sträng cDNA Synthese, RT-PCR, molekulare Klonen, Northern Blot, etc.
■ Echantillon: Déier Stoffer, cultured Zellen
■ Doséierung: Tissues 10-20mg, Zellen(2-5)×106
■ Maximal DNA Bindungskapazitéit vun der Reinigungskolonne: 80 μg
■ Elutiounsvolumen: 50-200 μl
Diagramm
Déier Total RNA Isolatioun Kit behandelt 20mg
Frësch Maus Echantillon, huelt 5% gereinegt Ganzen RNA 1% Agar
Glycogel Elektrophorese
1: Milz 2: Nier
3: Liewer 4: Häerz
Stockage an Regal Liewen
De Kit kann fir 24 Méint bei Raumtemperatur (15-25 ℃) oder 2-8 ℃ fir méi Zäit gelagert ginn.Buffer RL1 ka bei 4 ℃ fir 1 Mount gespäichert ginn nodeems β-Mercaptoethanol (optional) bäigefüügt ginn.
Zitéiert Artikelen
1.IF: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.mRNA-gelueden Lipid-ähnlech Nanopartikele fir d'Liewer Base Editing iwwer d'Optimiséierung vum Zentral Composite Design.Adv.Fonktioun.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Spontan Apoptose vun Zellen an der therapeutescher Stammzellpräparatioun übt immunmodulatoresch Effekter duerch Verëffentlechung vu Phosphatidylserin.Signal Transduct Target Ther.2021 Jul 14;6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97: Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosin tRNA Modifikatioun verbessert onkogene mRNA Iwwersetzung a fördert intrahepatesch Cholangiokarzinom Progressioun.Mol Zell.2021 29. Juli: S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Mettl14-Mediéiert m6A Modifikatioun erliichtert d'Leberregeneratioun andeems d'Endoplasmatesch Retikulum Homeostasis erhalen.Zell Mol Gastroenterol Hepatol.2021;12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
RNA Isolatiounskits fir aner Beispill Quellensinn verfügbar:
Zell, Planz, Viral, Blutt, asw.
RNA gëtt net extrahéiert oder d'RNA Ausbezuele si niddereg
Et ginn dacks eng Vielfalt vu Faktoren déi d'Erhuelungseffizienz beaflossen, sou wéi: Tissueprobe RNA Inhalt, Operatiounsmethod, Elutiounsvolumen, asw.
1. Eisbad oder kryogen (4 ° C) Zentrifugéierung gouf während der Operatioun gemaach.
Recommandatioun: Bedreiwen bei Raumtemperatur (15-25 ° C) duerch de ganze Prozess, net Äisbad an centrifuge bei niddregen Temperaturen.
2. Ongerecht Probekonservatioun oder exzessiv Prouflagerzäit.
Empfehlung: Echantillon bei -80 ° C stockéieren oder a flëssege Stickstoff afréieren a widderholl Frost-Thaw benotzen;probéiert frësch Tissue oder kultivéiert Zellen fir RNA Extraktioun ze benotzen.
3. Net genuch Prouf Lysis.
Empfehlung: Wann Dir Tissue homogeniséiert, gitt sécher datt den Tissu genuch homogeniséiert ass an datt d'Tissuezellen genuch gespléckt sinn fir d'Verëffentlechung vu RNA z'erklären.
4. D'Eluent gëtt net korrekt dobäigesat.
Recommandatioun: Bestätegt datt RNase-Free ddH2O gëtt dropweis an d'Mëtt vun der Reinigungskolonnemembran bäigefüügt.
5. De richtege Volumen vum absolute Ethanol gouf net op Buffer RL2 oder Buffer RW2 bäigefüügt.
Recommandatioun: Follegt d'Instruktioune, fügen d'korrekt Volumen vun absoluten Ethanol un de Buffer RL2 a Buffer RW2 a mëschen gutt ier Dir de Kit benotzt.
6. Tissue Prouf Doséierung ass net passend.
Empfehlung: Benotzt 10-20 mg Tissu oder (1-5) × 106Zellen pro 500 μl Puffer RL1, well exzessiv Tissueverbrauch kann zu enger reduzéierter RNA Extraktioun resultéieren.
7. Ongerechte Elutiounsvolumen oder onvollstänneg Eluéierung.
Empfehlung: D'Elutiounsvolumen vun der Reinigungskolonne ass 50-200 μl;Wann d'Elutiounseffekt net zefriddestellend ass, ass et recommandéiert d'Raumtemperatur Plazéierungszäit ze verlängeren nodeems de virgehëtzten RNase-Free ddH bäigefüügt ass.2O, zB fir 5-10 min.
8.The Purification Kolonn huet Ethanol Reschter no Buffer RW2 wäschen.
Recommandatioun: Wann et Ethanol Reschter no Buffer RW2 wäschen ass, eidel Rouer centrifugation fir 1min, d'Zäit fir déi eidel Rouer centrifugation Operatioun kann zu 2min erhéicht ginn, oder d'Rengung Kolonn kann bei Raumtemperatur fir 5 min plazéiert ginn adäquat ewechzehuelen de Rescht Ethanol.
Purifizéiert RNA gëtt ofgebaut
D'Qualitéit vun der gereinegt RNA ass verbonne mat Faktoren wéi d'Erhaalung vun der Probe, RNase Kontaminatioun, a Manipulatioun, asw.
1. Tissue Echantillon ginn net an der Zäit gehal.
Empfehlung: Wann Tissueproben oder Zellen net fristgerecht no der Sammlung benotzt ginn, cryopreserve direkt bei -80 °C oder flëssege Stickstoff.Fir RNA ze extrahieren, benotzt eng nei geholl Tissu- oder Zellprobe wann ëmmer méiglech.
2. Widderhuelend Afréiere-Tauung vun Tissueproben.
Recommandatioun: Wann Dir Tissueproben späichert, ass et am beschten se a kleng Stécker ze schneiden fir ze konservéieren, an ee vun de Stécker ze läschen wann Dir se benotzt fir widderholl Gefrier-Daching vun der Probe an d'Degradatioun vun der RNA ze vermeiden.
3. RNase gëtt agefouert oder net ewechzegeheien Handschuesch, Masken, etc.. während der Operatioun.
Empfehlung: RNA Extraktiounsexperimenter ginn am beschten an getrennten RNA Manipulatiounsraim gemaach an den Dësch gëtt virum Experiment geläscht.
Drot disposéierbar Handschuesch a Masken wärend dem Experiment fir d'RNA-Degradatioun ze minimiséieren déi duerch d'Aféierung vun RNase verursaacht gëtt.
4. Reagens gi kontaminéiert mat RNase während der Benotzung.
Recommandatioun: Ersetzen mat engem neien Animal Total RNA Isolation Kit fir ähnlech Experimenter.
5. D'Zentrifugerröhren, Tipps, etc., déi an der RNA-Manipulatioun benotzt ginn, sinn kontaminéiert mat RNase.
Empfehlung: Bestätegt datt d'Zentrifugerröhren, Tipps, Pipetten, asw.
Purifizéiert kritt RNA beaflosst downstream Experimenter
RNA gereinegt vun der Reinigungskolonne, wann d'Salzionen, de Proteingehalt ze grouss ass, beaflosst den Downstream Experiment, sou wéi: ëmgedréint Transkriptioun, Northern Blot et al.
1. Déi eluéiert RNA huet Salzionreschter.
Recommandatioun: Bestätegt datt de richtege Volumen vun Ethanol op de Buffer RW2 bäigefüügt gouf a 2 Reinigungskolonnewäschen op der Zentrifugalgeschwindegkeet fir Operatioun uginn;wann et e Salz Ionreschter ass, loosst d'Reinigungskolonne op de Buffer RW2 fir 5 min bei Raumtemperatur an fuert Zentrifugatioun fir d'Ewechhuele vu Salzkontaminatioun ze maximéieren.
2. Ethanol Rescht an elutioned RNA.
Empfehlung: Bestätegt datt nom Puffer RW2 wäschen, déi eidel Rouer-Zentrifugéierungsoperatioun mat der Zentrifugéierungsgeschwindegkeet, déi fir Operatioun uginn ass, ausféieren, d'Zäit vun der eidel Rouer-Zentrifugerungsoperatioun op 2 min erhéijen, wann et nach ëmmer Ethanolrest ass, oder lass et bei Raumtemperatur fir 5 min no der eidel Rouer-Zentrifugerung fir d'Ewechhuele vun Ethanolreschter ze maximéieren.
