Blutt RNA Isolatioun Kit
Beschreiwunge
De Kit adoptéiert d'Spinkolonn an d'Formel entwéckelt vun eiser Firma, déi effizient héich Rengheet a qualitativ héichwäerteg total RNA aus antikoaguléiert ganz Blutt extrahéiert.De Kit liwwert rout Bluttzelllysat (Buffer RCL), wat séier an effizient rout Bluttzellen lyse kann a wäiss Bluttzellen behalen.Déi effizient DNA-Cleaning Colunm kann den Supernatant an d'Zelllysaten einfach trennen an genomesch DNA adsorbéieren an ewechhuelen.D'Operatioun ass einfach an Zäitspuerend;D'RNA-nëmme Kolonn kann RNA effizient binden, a mat enger eenzegaarteger Formel kann et eng grouss Zuel vu Proben zur selwechter Zäit veraarbecht.
De ganze System RNase-Free mécht déi extrahéiert RNA net ofbaubar;Buffer RW1 a Buffer RW2 Puffer wäschen System mécht déi kritt RNA fräi vun Protein, DNA, Ionen an organesch Verbindung Pollutioun.
Kit Inhalt
Blutt Total RNA Isolatioun Kit | ||
Kit Zesummesetzung | RE-04011 | RE-04013 |
50 mol | 200 mol | |
Buffer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
Buffer BRL1* | 30 ml | 120 ml |
Buffer BRL2 | 18 ml | 66ml |
Buffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
Buffer RW2 | 24ml | 96ml |
RNase-Free ddH2 O | 10 ml | 40ml eng |
RNA-nëmmen Kolonn | 50 Sets | 200 Sets |
DNA-Botzen Kolonn | 50 Sets | 200 Sets |
manuell | 1 kopie | 1 kopie |
Fonctiounen & Virdeeler
-Kee Grond fir Suergen iwwer RNA Degradatioun ze maachen.De ganze Kit ass RNase-Free.
-Einfach - all Operatioune gi bei Raumtemperatur ofgeschloss.
-Fast-Operatioun kann an 20 Minutten ofgeschloss ginn.
-High RNA nozeginn: RNA-nëmmen Kolonn an eenzegaarteg Formel kann RNA effizient purify.
-Sécher - keen organesche Reagens benotzt.
-Large Probe Veraarbechtungskapazitéit - bis zu 200μl Proben kënnen all Kéier veraarbecht ginn.
-High Qualitéit - de gereinegt RNA ass héich reng, fräi vu Protein an aner Gëftstoffer, a ka verschidde downstream experimentell Uwendungen treffen.
Kit Parameteren
Kit Applikatioun:
Et ass gëeegent fir d'Extraktioun an d'Rengung vun total RNA aus Mamendéieren ganz Blutt.
Aarbecht Flux
Stockage Konditiounen
Buffer RCL (10 ×) soll bei 2-8 ℃ gespäichert ginn;aner Komponente vum Kit kënne bei Raumtemperatur (15-25 ℃) ënner dréchene Bedéngungen gelagert ginn a kënne fir 12 Méint gespäichert ginn.Buffer BRL1 ka bei 4 ℃ fir 1 Mount gespäichert ginn nodeems β-Mercaptoethanol (optional) bäigefüügt ginn.
Bemierkung: Wann d'Léisung bei niddreger Temperatur gelagert gëtt, ass d'Léisung ufälleg fir Nidderschlag.Gitt sécher d'Léisung am Kit bei Raumtemperatur fir eng Zäit virum Gebrauch ze setzen.Wann néideg, virhëtzt et an engem 37 ° C Waasserbad fir 10 Minutten fir de Nidderschlag opzeléisen, a gutt virum Gebrauch vermëschen.
Guiden fir Problemer Analyse
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail:Tech@foregene.com。
Keen RNA kann extrahéiert ginn oder d'Ausbezuele vun Nukleinsäure ass niddereg
Et gi meeschtens vill Faktoren déi d'Erhuelungseffizienz beaflossen, sou wéi: Probe RNA Inhalt, Operatiounsmethod, Elutiounsvolumen, etc..
Analyse vun allgemeng Ursaachen:
1.Eisbad oder Tieftemperatur (4 ° C) Zentrifugéierung während der Operatioun.
Virschlag: Raumtemperatur (15-25 ° C) Operatioun, ni Äisbad an niddreg Temperatur Zentrifuge.
2. Ongerecht Prouflagerung oder Probelagerung fir ze laang.
Virschlag: Echantillon bei -80 ° C gespäichert oder a flëssege Stickstoff afréieren, a vermeit widderholl Gefrier-Thaw benotzen;probéiert frësch gesammelt Proben fir RNA Extraktioun ze benotzen.
3.Insufficient Prouf Lysis
Recommandatioun: Gitt sécher datt d'Probe an d'Aarbechtsléisung (Linear Acrylamid) grëndlech gemëscht an 10 min bei Raumtemperatur (15-25 ° C) inkubéiert sinn.
4.Den Eluent gouf falsch bäigefüügt
Empfehlung: Vergewëssert Iech datt RNase-Free ddH2O an d'Mëtt vun der Membran vun der Reinigungskolonne bäigefüügt gëtt
5.Improper Volume vun anhydrous Ethanol am Buffer viRW2
Suggestioun: Follegt w.e.g. d'Instruktioune, füügt de richtege Volumen vun waasserdichtem Ethanol un de Buffer viRW2 a mëscht se gutt ier Dir de Kit benotzt.
6.Improper Probe Benotzung.
Virschlag: 200μl Prouf pro 500μl Buffer viRL.Exzessiv Probevolumen wäert zu enger reduzéierter RNA Extraktiounsquote féieren.
7.Improper elution Volume oder onkomplett elution.
Virschlag: D'Eluentvolumen vun der Reinigungskolonne ass 30-50μl;wann den Elutiounseffekt net zefriddestellend ass, ass et recommandéiert virgehëtzt RNase-Free ddH ze addéieren2O a verlängeren d'Zäit Plaz bei Raumtemperatur, wéi 5-10min
8.Purification Kolonn huet Ethanol Reschter no Spülen am Buffer viRW2.
Suggestioun: Wann Ethanol nach ëmmer nach Spülen am Buffer viRW2 an eidel Rouer Zentrifugatioun fir 2min bleift, kann d'Reinigungskolonne bei Raumtemperatur fir 5min no eidel-Röhre-Zentrifugerung verlooss ginn fir de Rescht Ethanol komplett ze läschen.
D'Degradatioun vu gereinegt RNA Moleküle
D'Qualitéit vun der gereinegt RNA ass verbonne mat Faktoren wéi Probelagerung, RNase Kontaminatioun, an Operatioun.
Analyse vun allgemeng Ursaachen:
1.Déi gesammelt Proben goufen net an der Zäit gespäichert.
Virschlag: Wann d'Probe net an der Zäit no der Sammlung benotzt gëtt, späichere se w.e.g. bei -80 ℃ oder flëssege Stickstoff direkt.Fir d'Extraktioun vun RNA Molekülle, probéiert frësch gesammelt Proben ze benotzen wann ëmmer méiglech.
2. Gesammelte Proben goufen ëmmer erëm gefruer an opgedaucht.
Virschlag: Vermeiden widderholl Afréiere an thawing (net méi wéi eemol) während Prouf Sammelstécker a Stockage, soss wäert d'Ausbezuelen vun Nukleinsäure erofgoen.
3.RNase gouf am Operatiounsraum agefouert oder keng Wegwerfhandschuesch, Masken, asw.
Virschlag: D'Extraktioun vun RNA Moleküle Experiment ass am beschten an engem separaten RNA Operatiounsraum ausgefouert, an den experimentellen Dësch gëtt virum Experiment gebotzt.Drot disposéierbar Handschuesch a Masken wärend dem Experiment fir RNA Degradatioun verursaacht duerch RNase Aféierung ze vermeiden.
4.De Reagens ass kontaminéiert vu RNase während der Benotzung.
Virschlag: Ersetzen mat neie Viral RNA Isolatioun Kit fir ähnlech Experimenter.
5.D'RNase Kontaminatioun vun den Zentrifuge Röhren, Pipette Tipps, asw Suggestioun: Vergewëssert Iech datt d'Zentrifugerröhren, Pipette Tipps a Pipette all RNase-Free sinn.
Déi gereinegt RNA Moleküle beaflosst downstream Experimenter
D'RNA Molekülle gereinegt vun der Reinigungskolonne beaflossen Downstream Experimenter wann et ze vill Salzionen oder Proteine gëtt, sou wéi: ëmgedréint Transkriptioun, Northern Blot, etc..
1.Et gi verbleiwen Salzionen an den eluéierten RNA-Moleküle.
Recommandatioun: Vergewëssert Iech datt de richtege Volumen vun anhydrous Ethanol zu Buffer viRW2 bäigefüügt gouf, a wäscht d'Rengungskolonne zweemol no der korrekter Zentrifugerungsgeschwindegkeet op der Betriebsinstruktioun; Wann et nach ëmmer Salzione bleiwen, kënnt Dir Buffer viRW2 an d'Rengungskolonne addéieren, a lass et bei Raumtemperatur fir 5min.Fuert dann d'Zentrifugerung fir d'Salzionkontaminatioun am gréissten Ausmooss ze läschen
2.Et bleiwen Ethanol an den eluéierten RNA-Moleküle
Virschlag: eemol bestätegt datt d'Preinungssäulen duerch Buffer viRW2 gespullt goufen, fuert eidel Tube-Zentrifugerung no der Zentrifugalgeschwindegkeet op den Operatiounsinstruktiounen.Wann et nach ëmmer Ethanol bleift, kann et 5 Minutte bei Raumtemperatur no enger eidel Rouer Zentrifugerung verlooss ginn fir de Rescht Ethanol am gréissten Ausmooss ze läschen.
Bedienungsanleitung:
Viral RNA Isolation Kit Bedienungsanleitung