Direkter RT-qPCR Kit
Kit Beschreiwung:
◮ Direkten RT-qPCR Kit, benotzt Foreasy Reverse Transcriptase an Foreasy HS Taq DNA Polymerase entwéckelt vu Foregene, mat eenzegaartege Reaktiounsbuffer, mécht dëse Kit mat staarker Resistenz a Kompatibilitéit, an et kann direkt Reaktioun testen benotzen Foregene Lysis System als Schabloun.Dëse Kit kann fir COVID-19 Nukleinsäure Detektioun Kit an aner pathogene Bakterien Nukleinsäure Detektioun Kit Entwécklung gëllen.
Beschreiwung
Direct RT-qPCR Kit bitt separat verpackt RT-qPCR Puffer an héich effizient EnzymMëschung (Taq, M-MLV, RI), mécht et bequem fir d'Schafe vu Back-End Kits a SystemUpassung, bannent einfacher Verifizéierung.
Spezifikatioune
500T, 50.000T
Kit Komponente
| Kit Inhalt (20 μL Reaktiounssystem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Direkt Enzymmix | 500 l× 1 | 50 ml× 1 |
| 2 × Direkter RT-qPCR Buffer | 1ml vun× 5 | 500 ml× 1 |
| Uweisunge | 1 | 1 |
Operatioun Schrëtt
Virun der Reagenspreparatioun sollten all d'Reagenser am Kit bei Raumtemperatur opgedaucht ginn a sanft gemëscht ginn.
A: Preparéieren of Schabloun an reagens
1. Preparéieren preparéiert RNA Schabloun (Et ass recommandéiert Foregene Total RNA Isolatioun Kit Serie Kit ze benotzen fir RNA Schabloun ze extrahieren an ze purifizéieren) oder Prouf knacken Produit (Et ass recommandéiert Foregene Lysis System ze benotzen), spezifesch primers (10 μM) an aner relevant consumables, Instrument.
2. Setzt den 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O an 20× ROX Reference Dye (wann et's néideg) an der Këscht mat Äis, sou datt dës natierlech schmëlzen, a sanft gemëscht ginn.
B: Preparéieren of RT-qPCR System
Dësch 1 : Preparéieren of RT-qPCR ssystem
| Komponent | Volumen | Finale Konzentratioun |
| 2 × Direkter RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Direkt Enzymmix | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Schabloun (RNA oder Lysat) | X μL | |
| 20 × ROX Referenz Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Gesamtvolumen | 20μL |
C: Setzt den RT-qPCR Reaktioun Programm
Dësch 2 : RT-qPCR reagéierenon Programm Astellung (fir Beispill: zwee-Schrëtt Method)
| Schrëtt | Temperatur | Zäit | Cyclen | Inhalt | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Reverse Transkriptioun |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Pre-Denaturatioun | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturatioun | |
| 60 ℃ | 30 sec 2* | Anneal / Extensioun | |||
Stockage an Regal Liewen
-De Kit soll bei -20 gespäichert ginn± 5℃.D'Validitéit Period ass 12 Méint.
-Vermeiden widderholl Afréiere-Thaw Zyklen (<5 Zyklen).
